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交叉配血試驗(yàn)簡(jiǎn)介

交叉配血試驗(yàn)包括主試驗(yàn)和副試驗(yàn)兩種。前者用受血者血清與供血者紅細(xì)胞懸液作試驗(yàn)以發(fā)現(xiàn)受血者血清中是否含有與供血者紅細(xì)胞反應(yīng)的抗體。又稱(chēng)直接配合或主側(cè)配合;后者則用供血者血清與受血者紅細(xì)胞作試驗(yàn)以發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體，又稱(chēng)間接配合。

臨床意義

在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過(guò)交叉配血試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應(yīng)，以保證受血者的輸血安全。因輸血直接涉及病人的生命安全，故病人與獻(xiàn)血員雖屬同一血型也應(yīng)進(jìn)行交叉配血。

交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù)，兩側(cè)均不凝集可輸血。若獻(xiàn)血人紅細(xì)胞與受血人血清(主側(cè))發(fā)生凝集應(yīng)禁止輸血;主側(cè)不凝集，次側(cè)(獻(xiàn)血人血清與受血者紅細(xì)胞)凝集，必要時(shí)可少量、慢速輸血。

交叉配血不能只進(jìn)行鹽水介質(zhì)交叉配血，在條件差的實(shí)驗(yàn)室也應(yīng)該進(jìn)行膠體介質(zhì)配血，以盡量消除不完全抗體存在的危害，減少輸血引起的不良反應(yīng)。

背景原因

ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞膜上存在的凝集原A與凝集原B的情況而將血液分為4型。

凡紅細(xì)胞只含A凝集原的，即稱(chēng)A型;如存在B凝集原的，稱(chēng)為B型;若A與B兩種凝集原都有的稱(chēng)為AB型;這兩種凝集原都沒(méi)有的，則稱(chēng)為O型。

不同血型的人的血清中各含有不同的凝集素，即不含有對(duì)抗內(nèi)他自身紅細(xì)胞凝集原的凝集素。在A型人的血清中，只含有抗B凝集素;B型人的血清中，只含有抗A凝集素;AB型人的血清中沒(méi)有抗A和抗B凝集素;而O型人的血清中則含有抗A和抗B凝集素。

在ABO系統(tǒng)血型相同的人之間進(jìn)行輸血，在輸血前必須進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)(cross-match test)，即不僅把供血者的紅細(xì)胞與受血者的血清進(jìn)行血清配合試驗(yàn)(這稱(chēng)為試驗(yàn)主側(cè));而且要把受血者的紅細(xì)胞與供血者的血清作配合試驗(yàn)(這稱(chēng)為試驗(yàn)的次側(cè))。

這樣，既可檢驗(yàn)血型測(cè)定是否有誤，又能發(fā)現(xiàn)他們的紅細(xì)胞或血清中，是否還存在一些其它的凝集原或凝集素，足以引起紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。在進(jìn)行交叉式配血試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)在37℃下進(jìn)行，以保證可能有的凝集反應(yīng)得以充分顯示。

試驗(yàn)方式

交叉配血試驗(yàn)有多種方式，如鹽水法、酶技術(shù)配血法、膠體介質(zhì)配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。

微柱凝膠試驗(yàn)微柱凝膠試驗(yàn)(Microtubes Gel Test，MGT)是20世紀(jì)90年代先后進(jìn)入國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室并用于交叉配血的新方法。在一些先進(jìn)國(guó)家已成為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)。而凝聚胺用于不完全抗體的測(cè)定與鑒定以及交叉配血等血清學(xué)試驗(yàn)也已在國(guó)內(nèi)迅速推廣使用。該方法簡(jiǎn)便、時(shí)間短、結(jié)果明顯。

材料和試劑

診斷用人血型抗A血清、診斷用人血型抗B血清(常在血清中加入不同顏色的染料以示區(qū)別，如A型紅色，B型藍(lán)色)、生理鹽水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%紅細(xì)胞懸液、受血者的2%紅細(xì)胞懸液。

器具

凹玻片或載玻片、小試管、尖嘴滴管、無(wú)菌刺血針、牙簽、酒精棉球、無(wú)菌干棉球、試管架、顯微鏡、記號(hào)筆等。

操作過(guò)程

1、首先準(zhǔn)備好受血者和獻(xiàn)血者的血樣。

2、分別用生理鹽水配好用受血者2·5%的紅細(xì)胞鹽水懸液、獻(xiàn)血者2·5%紅細(xì)胞鹽水懸液。

3、主側(cè)加受血者血清0.5ml，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞鹽水懸液0.5ml。

4、次側(cè)加獻(xiàn)血者血清0.5ml，受血者紅細(xì)胞鹽水懸液0.5ml。

5、混勻后，根據(jù)所用交叉配血方式，如酶技術(shù)配血法，可在37度水浴箱孵育1小時(shí)后，直接觀察有無(wú)凝集或溶血;若選用鹽水介質(zhì)等方法，則需1000rpm離心1min;或選用一定的速度離心相應(yīng)的時(shí)間，如聚凝胺試劑提供的轉(zhuǎn)速和時(shí)間。

結(jié)果觀察

先觀察上清液的顏色，然后再輕搖試管觀察有無(wú)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象發(fā)生;

結(jié)果判定:如試管內(nèi)紅細(xì)胞呈均勻混濁無(wú)顆粒出現(xiàn)即無(wú)凝集，上清液呈正常血清狀顏色為交叉配血試驗(yàn)相合。如上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，紅細(xì)胞成塊即為凝集現(xiàn)象，為交叉配血試驗(yàn)不相合

正常范圍

主試驗(yàn)和副試驗(yàn)均不出現(xiàn)凝集(也不溶血)即說(shuō)明受血者和供血者ABO血型相配。

主試驗(yàn)和副試驗(yàn)都不出現(xiàn)凝集和溶血現(xiàn)象才可輸血。如果交叉配血試驗(yàn)的兩側(cè)都沒(méi)有凝集反應(yīng)，即為配血相合，可以進(jìn)行輸血;

若獻(xiàn)血人紅細(xì)胞與受血人血清(主側(cè))發(fā)生凝集應(yīng)禁止輸血，則為配血不合，其血絕對(duì)不可輸入。

主試驗(yàn)不發(fā)生凝集，副試驗(yàn)發(fā)生凝集，可適當(dāng)少量輸血 (不宜超過(guò)200ml)。輸血時(shí)不宜太快太多，并密切觀察，如發(fā)生輸血反應(yīng)，應(yīng)立即停止輸注。

注意事項(xiàng)

待檢紅細(xì)胞懸液不宜過(guò)稀或過(guò)濃;

所用的試劑必須在有效期內(nèi);

氣溫較高時(shí)，為防止標(biāo)本干涸所致的假陽(yáng)性，可將玻片放入有一濕棉球的平皿中。若室溫過(guò)低，可將玻片置于28℃右右的溫箱中;

注意區(qū)分紅細(xì)胞的疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象。前者滴加生理鹽水1~2滴混勻后，紅細(xì)胞即可分散成渾濁狀，而后者則不因此而改變;

利用已知A型和B型紅細(xì)胞與一系列稀釋的待檢血清作凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集效價(jià)(以出現(xiàn)凝集的最高稀釋度)的高低可作為判斷體液免疫功能的一項(xiàng)指標(biāo)。多數(shù)免疫功能正常的半歲嬰兒，除AB型外，血清中相應(yīng)的抗A效價(jià)≥1:8，抗B效價(jià)≥1:4。一歲后，凝集效價(jià)也相應(yīng)提高。